CA1640 SF488標記鬼筆環肽(綠色)
產品名稱:CA1640 SF488標記鬼筆環肽(綠色)
產品描述:
注意事項
本產品為凍干粉形式,使用前請瞬時離心,加適當溶劑溶解后使用。
儲存條件
-20℃干燥、避光保存,自收貨之日起一年有效。若配制成水溶液,應小量分裝保存。
產品介紹
鬼筆環肽是從致命的傘形毒蕈蘑菇中分離出來的一種毒素。 它是特異性結合于F-肌動蛋白的雙環肽(1)。因此用熒光染料標記的鬼筆環肽可以非常方便的研究F-肌動蛋白的分布。鬼筆環肽內部,在半胱氨酸和色氨酸之間含有不常見的硫醚橋形成內環結構。 在pH升高時,該硫醚被裂解,鬼筆環肽失去對肌動蛋白的親和力。
熒光標記的鬼筆環肽可在納摩爾水平染色F-肌動蛋白(1-3)。在各種植物細胞或動物細胞中,標記的鬼筆環肽對大、小細絲具有相似的親和力,平均每個肌動蛋白亞基結合一個鬼筆環肽分子。不同于抗體,鬼筆環肽與肌動蛋白的結合親和力在不同物種間沒有顯著變化。非特異性染色可以忽略不計,染色和未染色區域之間的對比度非常大。鬼筆環肽將單體/聚合物的平衡轉向聚合狀態,將聚合臨界濃度降低至30倍(3,4)。Phallotoxins可通過抑制細胞松弛素的解聚,碘化鉀和升高的溫度,穩定F-肌動蛋白,。因為鬼筆環肽綴合物很小,大約直徑12-15埃,分子量<2000道爾頓,多種肌動蛋白結合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌鈣蛋白依然可以和鬼筆環肽標記的肌動蛋白結合。更重要的是,鬼筆環肽標記的肌動蛋白絲保持功能,標記甘油肌纖維仍然收縮,標記的肌動蛋白絲仍然可以繼續移動(5,6)。而且熒光標記的鬼筆環肽也可用于對細胞中F-肌動蛋白進行定量研究(7,8)。
實驗方法
儲液制備
熒光染料標記的鬼筆環肽:取適量甲醇或無菌水溶解棕色管中凍干的粉末,制備成200U/mL的儲液(300T規格染料加入1.5mL的液體)。
熒光標記的標記鬼筆環肽的一個單位(T)的定義是染色一個加載細胞的載玻片所用染料的量。使用時的推薦稀釋比例為1:40-1:200,一個單位相當于200μL總染色體積中加入1-5μL 200U /mL儲備溶液。
注:稀釋比例可以根據實際染色效果進行適當調整。
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主營產品:COF、MOF單體系列:三蝶烯衍生物、金剛烷衍生物、四苯甲烷衍生物、peg、上轉換、石墨烯、光電材料、點擊化學、凝集素、載玻片、蛋白質交聯劑、脂質體、蛋白、多肽、氨基酸、糖化學等。