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磁珠法分離純化不同大小的DNA-片段
文章來源 : 齊岳生物
作者:zhn
發(fā)布時間 : 2022-08-23 12:41:44
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產(chǎn)品名稱:磁珠法分離純化不同大小的DNA-片段
產(chǎn)品描述:
磁珠法分離純化不同大小的DNA-片段 ?磁珠法是一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法,主要原理為:在不同濃度的PEG(polyethylene glycol;聚乙二醇)中,會有不同片段大小的DNA吸附在磁珠的羧基修飾層上,這些DNA可以再溶解在水中,以此來洗脫回收。 ????實(shí)驗(yàn)使用的磁珠分為五層(圖1;直徑1微米),由內(nèi)而外依次為:聚苯乙烯材料的、順磁材料(主要為四氧化三鐵)、層聚苯乙烯材料、層順磁材料以及表面粗糙的羧基修飾層。粗糙的表面更利于核酸與羧基修飾層結(jié)合。 ? 圖1.磁珠各層成分 ?在整個體系中,PEG的濃度是影響DNA回收的決定性因素(其他因素還包括DNA大小和濃度、鹽離子濃度、作用時間等等)。DNA在濃度的PEG存在條件下,NaCl或MgCl2下,使DNA發(fā)生脫水反應(yīng),分子構(gòu)象會發(fā)生急劇變化,由線狀被壓縮形成卷曲球狀,繼而聚集沉淀,同時隨PEG分子量、濃度以及鹽濃度的不同,不同長度的DNA可以被選擇性的沉淀出來。在磁珠體系中,某些分子量(常用的是PEG8000)的PEG的功能主要是與鹽離子共同作用,改變不同長度DNA的分子構(gòu)象,同時增加體系的粘稠程度,使磁珠在其中處于懸浮狀態(tài),不易沉降,增加磁珠在空間位置的碰撞與排斥,從而增加核酸與磁珠的聚集效率與,除此之外,PEG與具有相容性,也可樣品中的。 ? 圖2. 磁珠與DNA結(jié)合示意圖 當(dāng)前主流觀點(diǎn)認(rèn)為,處于PEG和鹽離子環(huán)境中的DNA,因脫水作用而發(fā)生分子構(gòu)象改變后,會暴露出磷酸骨架上大量的帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán),與表面帶負(fù)電荷的羧基磁珠結(jié)合。負(fù)負(fù)電荷之間的作用是由于帶正電荷的鹽離子的作用(如Na+;圖2)。帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)借由解離的鹽離子(如Na+)與羧基形成離子橋,使DNA被性吸附到羧基磁珠表面。當(dāng)PEG和鹽類被之后,加入水性分子,會充分水化DNA,解除其三者之間的離子相互作用,使得吸附到磁珠的DNA被純化出來。 操作的具體步驟如下圖3(0.6xDNA溶液體積的0.6倍;該倍數(shù)要依據(jù)各自不同的實(shí)驗(yàn)體系自行檢測調(diào)整): ? 圖3.磁珠法分離400-600bp DNA-片斷的步驟 如果只是分離純化單條帶PCR產(chǎn)物,我們通常使用1.2x的磁珠,與PCR產(chǎn)物在EP管內(nèi)混合后放在磁力架上1分鐘,丟棄上清,70%酒精洗滌兩次后室溫干燥,然后將EP管從磁力架上取下,TE或者純水與磁珠混合,然后放回磁力架取上清,整個過程耗時約15分鐘。 磁珠DNA分離法中多次使用了磁力架,來使磁珠聚合并方便除去洗脫液。一般磁力架(針對EP管或者96孔PCR板)約1000-5000人民幣,而我們實(shí)驗(yàn)室(海洋大學(xué)海洋生物多樣性與進(jìn)化研究所-進(jìn)化基因組學(xué)研究室)能夠通過3D打印機(jī)自行打印并使用了稀土材料制作的高強(qiáng)永磁鐵,甚至好于商業(yè)化產(chǎn)品。具體制作方法我們會在之后的推送中介紹。 齊岳供應(yīng): 硅基磁珠 固相萃取磁珠 PuriMag Si-benzylchloride 芐基氯修飾磁珠 PuriMag Si-benzol 苯基修飾磁珠 PuriMag Si-Cyclohexane 環(huán)己基修飾磁珠 PuriMag Si-C18 十八烷基修飾磁珠|Dynabeads? RPC 18等效磁珠|C18磁珠 PuriMag Si-C12 十二烷基修飾磁珠|Dynabeads? RPC 18等效磁珠|疏水磁珠 PuriMag Si-C8 辛基修飾磁珠|疏水磁珠|Dynabeads? RPC protein等效疏水磁珠 PuriMag Si-Cl氯丙基修飾磁珠 PuriMag Si-C3 丙基修飾磁珠|Dynabeads? RPC protein等效疏水磁珠 偶聯(lián)用磁珠 PuriMag Si-DEAE 單核硅質(zhì)DEAE弱陰離子交換磁珠 PuriMag Si-SH 巰基修飾磁珠 PuriMag Si-Epoxy 環(huán)氧基修飾磁珠|環(huán)氧基磁珠|硅包覆環(huán)氧基磁珠 PuriMag Si-COOH 羧基修飾磁珠|羧基磁珠|硅羧基磁珠 氨基磁珠|硅包覆氨基磁珠|PuriMag Si-NH2 氨基修飾磁珠|amine magnetic bead 核酸提取磁珠 核酸DNA/RNA提取純化磁珠 氨基修飾 核酸DNA/RNA純化提取磁珠 羧基修飾 DNA提取硅羥基磁珠|RNA提取磁珠|核酸提取磁珠 GMA磁珠 親和素磁珠|親和素標(biāo)記磁珠|avidin magnetic bead 巰基磁珠PuriMag G-SH NHS磁珠|高載量PuriMag G-NHS磁珠 疊氮磁珠|Azide 磁珠|炔烴標(biāo)記蛋白點(diǎn)擊偶聯(lián)|PuriMag G-Azide Beads|Azide magnetic bead 蛋白L磁珠|Protein L磁珠|Protein L magnetic bead|抗體純化|沉淀 蛋白A/G磁珠|Protein A/G磁珠|Protein A/G magnetic bead 蛋白G磁珠|ProteinG磁珠|Protein G magnetic bead 蛋白A磁珠|Protein A磁珠|Protein A magnetic bead|沉淀|抗體純化 磁珠|修飾磁珠|biotin磁珠|biotin magnetic bead|PuriMag? G-Biotin 甲苯磺酰基活化磁珠|PuriMag G-Ts聚合物磁珠 氨基磁珠|高密度氨基磁珠|聚合物磁性微球|PuriMag G-NH2|amine magnetic bead 羧基磁珠|羧基修飾磁珠|高密度羧基磁珠|聚合物羧基磁珠PuriMag G-COOH|carboxyl magnetic bead 羥基磁珠聚合物包覆磁珠PuriMag GS-OH(短臂) 環(huán)氧基磁珠|聚合物包覆磁珠PuriMag G-Epoxy|高環(huán)氧基密度磁珠| 鏈霉親和素磁珠|SA磁珠|親和素磁珠|PuriMag G-streptavidin 高biotin結(jié)合容量 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—陽離子交換 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—陰離子交換 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面氯甲基 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面環(huán)氧基|環(huán)氧基磁珠|高密度環(huán)氧基磁珠 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面羧基|羧基磁珠|高密度羧基 聚苯乙烯磁性微球 羧基磁珠|化學(xué)發(fā)光磁珠|發(fā)光磁珠 鏈霉親和素磁珠|1微米 SA 磁珠|發(fā)光磁珠|鏈霉親和素標(biāo)記磁珠 均一單分散磁珠表面二氧化硅包覆PuriMag-Homo-SiO2 均一單分散磁珠表面聚合包覆PuriMag-Homo-polymer 瓊脂糖磁性微球 偶聯(lián)用瓊脂糖磁珠 羧基活化瓊脂糖磁珠|羧基瓊脂糖微球|Magarose-COOH 氨基活化瓊脂糖磁珠|氨基瓊脂糖微球|Magarose-NH2 NHS活化瓊脂糖磁珠|NHS瓊脂糖微球|Magarose-NHS 環(huán)氧基活化瓊脂糖磁珠|環(huán)氧基瓊脂糖微球|Magarose-Epoxy CNBr活化瓊脂糖磁珠|CNBr瓊脂糖微球|Magarose-CNBr 醛基活化瓊脂糖磁珠|醛基瓊脂糖微球|Magarose-CHO 瓊脂糖磁性微球|瓊脂糖磁珠|Magnetic agarose bead 蛋白純化瓊脂糖磁珠 Protein A/G包被瓊脂糖磁珠|Protein A/G包被瓊脂糖微球|Magarose-ProA/G Strep-tag II蛋白純化磁珠|Strep-Tactin瓊脂糖磁性微球 DEAE弱陰離子交換瓊脂糖磁珠 肝素包被瓊脂糖磁珠|Heparin包被瓊脂糖微球 GST融合蛋白純化用瓊脂糖磁珠 His-tag標(biāo)簽蛋白純化磁珠Magarose TED 組氨酸標(biāo)簽蛋白純化磁珠|Magarose NTA His標(biāo)簽蛋白純化磁珠|Magarose IDA 其他 羧基磁珠|羧基磁性微球|羧基磁性納米粒子 Fe3O4磁核|順磁性納米氧化鐵|鐵氧體磁珠|200-400nm磁性納米粒子 PCR產(chǎn)物純化磁珠|Agencourt AMPure XP等效磁珠 磁珠 鏈霉親和素磁珠 鏈霉親和素-(SA-Biotin) Streptavidin/SA/鏈霉親和素 蛋白偶聯(lián)鏈霉親和素共價連接于固相載體表面 結(jié)合化抗 體、核酸、蛋白等配體分子 沉淀磁珠Protein A/G Mag NH修飾生物配體偶聯(lián)磁珠 Magrose NHS修飾生物配體偶聯(lián)磁珠 基礎(chǔ)磁珠 羥基磁珠Mag OH/核酸提取和純化設(shè)計 羧基磁珠Mag COOH 順磁性、磁響應(yīng)性、豐富羧基官能團(tuán)、單分散性和亞微米尺度粒徑 蛋白分離純化羧基磁珠 羧基磁珠高載量蛋白/多肽/寡聚核苷酸/科研分子 氨基磁珠Mag NH2 單分散性氨基磁珠 寡聚核苷/蛋白/多肽-戊二醛-共價偶聯(lián)微球表面 葡聚糖納米磁珠Dextran 順磁性氧化鐵顆粒粒徑為13-15 nm之間 蛋白純化磁珠 His-tag蛋白純化磁珠 IDA-Nickel IDA-Cobalt IDA-Nickel Kit IDA-Cobalt Kit GST融合蛋白純化磁珠 融合蛋白純化磁珠GSH 融合蛋白純化磁珠GSH kit Strep-tag II蛋白純化磁珠 功能化材料Strep-tag II 功能化材料蛋白純化磁珠 Magrose Strep-Tactin Magrose Strep-Tactin kit rp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys 肝素磁珠 Magrose Heparin 的磁響應(yīng)性的肝素磁珠 磁珠表面偶聯(lián)肝素帶有負(fù)電性硫酸根離子基團(tuán) DEAE磁珠 Magrose DEAE弱陰離子交換磁珠 的磁響應(yīng)性DEAE磁珠 離子交換能力的DEAE磁珠 的蛋白結(jié)合能力的DEAE磁珠 離子交換配基為二乙氨乙基的DEAE磁珠 抗體純化磁珠 Protein A/G抗體純化磁珠 Protein A Antibody Purification Kit Protein A/G Antibody Purification Kit Magrose ProteinA Antibody Purification 核酸提取磁珠 DNA/RNA提取試劑盒Viral DNA/RNA Kit 游離DNA提取試劑盒Circulating DNA Ki 唾液基因組DNA提取試劑盒Saliva DNA Kit 糞便總DNA提取試劑盒Stool DNA Kit 血液基因組DNA提取磁珠試劑盒Blood DNA Extraction Kit DNA-片段篩選試劑盒(磁珠法)DNA Select Isolation PCR產(chǎn)物純化試劑(磁珠法)PCR Purification 凝膠回收試劑盒 質(zhì)粒 DNA 小量抽提試劑盒 上述產(chǎn)品齊岳生物均可供應(yīng),用于科研! wyf 02.01 ? 相關(guān)目錄: 巨噬細(xì)胞外囊泡(EVs)包裹白介素10(I 層析介質(zhì)-離子交換樹脂使用注意事項(xiàng)聯(lián)系我們:
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